疫苗和免疫刺激剂,本质上是预防性虾类疾病的,用于提高宿主的免疫能力。
一、疫苗和免疫刺激剂在养虾当中的作用
Musthaq和Kwang详细研究了白斑病(WSD)疫苗接种的前景,最近的很多研究也引用了“免疫引发”的概念,并被认为是针对WSD疫苗一种优化解决的方案。它涉及病*RNA/DNA、减*病*和重组病*蛋白的应用,所有这些疫苗的治疗方法,可以为对虾提供一段时间保护。因此,疫苗接种是一种很有前途的抗病手段,但针对大多数虾病*的有效疫苗并不多(图4)。
与哺乳动物和其他脊椎动物不同,虾类不具备适应性免疫系统,因此必须依赖先天免疫系统。因此,为虾开发疫苗是相当麻烦的,并且是价格非常昂贵,如果你想为池塘的每条虾单独接种疫苗,是一项几乎不可能完成的工作。
图4:疫苗接种对虾类的影响
因此,目前,免疫刺激剂是对抗虾病的最具实用性的方法。免疫刺激剂是有效增强宿主的非特异性防御机制,以对抗入侵的微生物分子。它们弥补了抗生素治疗剂/疫苗使用的不足,并为虾免疫系统提供了有效的解决方案。因此,免疫刺激剂可能被认为是虾类健康管理的一种最好的选择(图5)。
图5:免疫刺激剂对虾类养殖及其环境的影响
二、针对白斑综合症病*(WSSV)的免疫刺激剂
免疫刺激剂是一种天然存在的物质,可以模拟宿主的免疫系统对抗病原体。免疫刺激剂可以根据其来源分为几组:细菌、藻类、动物、营养因子和激素/细胞因子(图6),这些免疫刺激剂具有很多的功能(图7)。
图6:免疫刺激剂的来源
图7:免疫刺激剂的作用
三、植物抗病*药物
植物是安全而经济化合物的仓库,这些化合物具有各种特性,如:促进生长、免疫刺激和抗菌。这些化合物具有优势,因为它们具有无*、可生物降解和生物相容性较强。
京尼平的抗病*活性
京尼平(Genipin,GN)是一种从栀子果实中提取的生物活性化合物,是一种低*、生物相容性好的天然物质,它具有抗炎、神经保护、抗糖尿病、抗氧化和抗病*活性等作用。最近,GN对WSSV的抗病*活性已在克氏原螯虾和南美白对虾当中被证实,在1KG的饲料当中添加50mg的京尼平,可最大限度地抑制WSSV的感染。
四、来自草药的免疫刺激剂
口服免疫刺激剂,如脂多糖等,可以增加虾类对WSD的防御能力。最近,多种草药提取物已证明它们能够增强虾对*头病*(YHV)和WSSV的免疫力)。来自5种不同的草本植物的提取物,是高效免疫刺激剂。在饲料当中添加墨旱莲(Ecliptaalba)、盾木橘(Aeglemarmelos)、心叶青牛胆(Tinosporacordifolia)、胡*连(Picrorhizakurooa)和青鳉(Cyanodondactylon),虾的存活率得到增加,病*载量显着降低。
五种草药,如:龙头草、大花金金菊、蜂巢草、补骨脂和栎树,已被用于使用不同的有机极性和非极性溶剂筛选,发现对WSSV具有较强的抗病*和免疫刺激活性。
1、蓟罂粟(Argemonemexicana)
蓟罂粟具有很高的药用价值,在墨西哥、美国西部和印度的部分地区被人们广泛使用。蓟罂粟用于治疗多种疾病,包括:肿瘤、肿块、皮肤病、炎症、关节疼痛、麻风病、疟疾和微生物感染。该植物的化学成分多样化,包括各种生物碱、酚类物质,还具有具有抗氧化活性,因此,可用作缓解与氧化应激相关的疾病。
因为它含有三萜、生物碱、*酮类化合物和单宁等植物化学物质,可以引起对虾proPO系统刺激抗氧化酶的产生,如:活性氧中间体(ROI)和活性氮中间体(RNI),抗菌肽和溶菌酶,最终增强吞噬作用。
在一项对虾感染WSSV的研究当中,对照组(虾饲料中未添加蓟罂粟)的虾在4天内就出现%的死亡率,而研究组(虾饲料中添加蓟罂粟)的虾存活率高达79%。
2、水*皮(Pongamiaglabravent)
水*皮(豆科植物)是一种土著民族医学植物,遍及印度,亚洲和澳大利亚北部。它是一种中等大小,快速生长的植物,通常生长在路边,河岸,潮汐森林,甚至沿海地区。这种植物的叶子以治疗痔疮、疼痛而闻名。当感染虾类感染WSSV时,在1KG的饲料当中加入g和g水*皮,存活率分别提高了40%和80%。
3、榴梿提取物:多糖凝胶
榴梿是南亚最普遍的树种,尤其是泰国。榴莲皮的多糖凝胶(PG)是一种水溶性果胶多糖,人们发现它具有抗菌作用,还能帮助伤口愈合和免疫调节。
研究人员发现,在饲料当中添加1%和2%多糖凝胶(PG),有助于提升虾的proPO活性以及升高的THC值,这个表明多糖凝胶(PG)对WSSV产生抗性。
五、来自细菌的抗病*药物
口服接种一些有益细菌,也被认为是虾类对抗病*的重要手段。因为,RNA干扰(RNAi)也被用来抑制病*蛋白的表达,以诱导宿主对WSD的免疫。
研究表明,用肽聚糖喂养日本对虾,可提高宿主颗粒细胞的吞噬活性,从而显著降低日本对虾感染WSSV后的死亡率。另外一项研究显示,在WSSV感染使用β-葡聚糖激活了酚氧化酶原系统,对虾的发病率降低了25%-50%。因为它们促进先天免疫反应。
另一个重要的细菌成分是脂多糖(LPS)。LPS是革兰氏阴性菌外膜的主要成分,可刺激不同宿主的免疫反应,它们由通过共价键连接的脂质和多糖构成。脂质与多糖一起被认为是LPS生物活性的原因,研究显示喂食LPS的虾类,具有更高的存活率。
六、来自藻类的抗病*药物
海藻是一种多细胞藻类,由于广泛存在的生物活性化合物,可以对水产养殖中的病原体产生抗性,因此可以作为免疫刺激剂。
此外有研究证实,褐海藻含有多糖,并对水生物种的疾病有治疗效果。比如:褐藻多糖提取物,可以提升斑节对虾(Penaeusmonodon)和刺参对虾(marsusaeusjaponicus)对WSD的抗性。近年来多项研究表明,褐藻多糖在对虾的防御机制中发挥着重要作用,它可介导对虾对抗病*的细胞和体液反应。它阻碍病*粒子的吸收,促进病*诱导的合胞体的形成。通过直接抑制病*复制,以及触发先天免疫防御反应,对病*疾病具有较强的防御作用。
七、来自真菌的抗病*药物
酵母中有多种成分对人类和其他动物具有营养价值,包括:蛋白质、碳水化合物、脂质、维生素和矿物质。酵母提取物由酵母细胞的水溶性成分组成,如:氨基酸、肽、碳水化合物和盐。近年来,酵母已被证明具有抗氧化和免疫刺激特性。面包酵母和啤酒酵母产生的多糖含有多种化合物,包括糖、葡聚糖和核酸以及甘露寡糖,这些化合物已被证明可以改善多种虾类的免疫反应和生长速度。
八、动物抗病*药物
在一些研究中,动物也被用来提取抗病*药物,以治愈虾类的WSSV病*。在最近的一项研究中,cathelicidin5是一种从扬子鳄中提取的抗WSSV的抗菌肽。研究显示,用cathelicidin5药物治疗WSSV,虾显示出较低死亡率。
此外,几丁质是一种普遍存在于昆虫、甲壳类动物外骨骼和真菌细胞壁中的多糖,并且是自然界中最普遍存在的多糖之一,现在也被证实可以保护鱼和虾免受细菌感染。
九、合成来源的免疫刺激剂
目前,纳米技术正被用于研究非常复杂的生物系统,其中。银纳米粒子(AgNPs)目前是非常有前途的纳米材料,因为它们具有较强的抗病*特性。多项研究证实,AgNPs是一种潜在的抗人类病*疾病的产品,包括甲型H1N1流感病*、猴痘病*。
许多研究表明AgNPs在许多疾病治疗方面效果非常好,可以有效对抗病*。这些研究证实,AgNPs优先与病*包膜糖蛋白结合,以阻碍病*与宿主细胞之间的结合。此外,免疫系统可以很好地识别纳米颗粒,这些颗粒有助于在免疫系统中诱导免疫刺激效应。
十、来自营养因素的免疫刺激剂
当虾摄食维生素A、C和E时,它们对病原体的抵抗力显着增加。同样,类胡萝卜素增强中性细胞和巨噬细胞的吞噬和细菌杀伤能力。在虾饲料当中,添加类胡萝卜素,增强了对虾感染病*前后的抗应激能力、抗盐度冲击能力和抗氧化反应。
十一、来自激素的免疫刺激剂
生长激素(GH)是一种多肽激素,具有许多有益作用,例如促进脂肪分解、糖异生、增加蛋白质合成和刺激免疫反应等。在虾苗当中中,一种重组牛生长激素已被证明可以改善虾苗的发育和免疫力。在罗氏沼虾的饲料当中,添加牛乳铁蛋白(LF),改善了甲壳类动物的免疫指数和抵抗细菌攻击的抵抗力。
十二、虾体内免疫刺激机制
如上所述,虾缺乏适应性免疫,但它们已经进化出发达的先天免疫系统来保护自己免受疾病侵害。它们有坚硬的外壳作为抵御病原体的第一道防线,其本身含有碳酸钙、碳水化合物和蛋白质,并有助于多种免疫相关的生理功能。另外,外壳中的抗菌剂可以保护它们免受各种伤害和微生物攻击。
在绕过最初的外壳之后,病原体能够进入虾的血腔。血腔由各种血细胞组成,这些血细胞是负责保护虾的身体免受入侵者的主要细胞。
在虾类当中,已知三种血细胞参与免疫:
1、参与吞噬作用的透明血细胞
2、颗粒细胞,参与黑色素化、抗菌肽和细胞*性
3、半颗粒细胞,参与封装、非自身物质识别、黑化和凝血。
病原体相关分子模式(PAMP)是在病原体上看到的独特模式,可让虾血细胞检测和破坏非自身物质(PAMP)。虾的先天系统因入侵病原体的存在而被激活,因为它能够区分入侵病原体的“非自身”细胞和属于自身的“自身细胞”。虾的血细胞通过识别病原体相关分子模式(PAMP)上的特定模式来识别和消除非自身物质。
十三、总结:
来自植物、动物、真菌、藻类和酵母在内的天然药物,是一种价格低廉、且容易获得的免疫刺激剂,当这些免疫刺激剂加入虾饲料时,虾的存活率大大提高,他们是预防和治疗鱼虾疾病,最有希望和最有效的工具。
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